1、免疫动物
免疫动物是用目的抗原免疫小鼠，使小鼠产生致敏B淋巴细胞的过程；
2、细胞融合
采用眼球摘除放血法处死小鼠，无菌操作取出脾脏，在平皿内挤压研磨，制备脾细胞悬液 。将准备好的同系骨髓瘤细胞与小鼠脾细胞按一定比例混合 ， 并加入促融合剂聚乙二醇 。在聚乙二醇作用下，各种淋巴细胞可与骨髓瘤细胞发生融合，形成杂交瘤细胞；
【单克隆抗体的制备步骤】3、选择性培养
选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞 ， 一般采用HAT选择性培养基；
4、杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化
采用灵敏、快速、特异的免疫学方法 ， 筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞，并进行克隆扩增；
5、单克隆抗体的大量制备
单克隆抗体的大量制备一般采用动物体内诱生法和体外培养法 。
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